Коні, антибіотики і ґрунт: як правильно готувати проби, щоб LC-MS/MS не брехав
Дослідники підібрали оптимальні методи екстракції та концентрування ветеринарних препаратів із кінських фекалій, ґрунту та підстилки для аналізу LC-MS/MS. Це дозволить точніше оцінювати, скільки ліків потрапляє в довкілля після лікування коней, і чи створює це ризик резистентності бактерій.
У свіжій публікації в Environmental Toxicology and Pharmacology (серпень 2026) команда під керівництвом Ель Аббаді вирішувала прикладну проблему: як надійно виміряти залишки ветеринарних препаратів у зразках, пов'язаних із конярством. Це фекалії, ґрунт із левад та пасовищ, а також підстилка (солома чи тирса).
Суть проблеми. Коням часто дають протизапальні (фенілбутазон, флуніксин), антибіотики (пеніциліни, триметоприм-сульфаметоксазол) та антигельмінтики (івермектин). Значна частина цих речовин виходить із організму в незміненому вигляді або у вигляді активних метаболітів із фекаліями та сечею. Далі вони потрапляють у ґрунт і можуть впливати на мікробіом, а також сприяти селекції стійких бактерій. Але щоб це оцінити, треба спершу навчитися ці залишки вимірювати.
Що зробили. Автори порівняли різні підходи до підготовки проб:
- Екстракція: тестували ультразвукову обробку, струшування та QuEChERS (метод, який зазвичай використовують для пестицидів у їжі).
- Очищення: порівнювали твердофазну екстракцію (SPE) на різних сорбентах (HLB, C18) та просте розведення зразка.
- Концентрування: випарювання під азотом проти ліофілізації (сублімаційного висушування).
Ключові результати. Для фекалій найкраще спрацював QuEChERS із наступним очищенням на сорбенті HLB: це дало найвищий відсоток вилучення (80–110%) для більшості цільових сполук, включно з полярними метаболітами. Для ґрунту ефективнішою виявилася ультразвукова екстракція з сумішшю ацетонітрил-вода (70:30) з додаванням EDTA — він запобігає зв'язуванню тетрациклінів із металами в ґрунті. Для підстилки — просте струшування з підкисленим ацетонітрилом, без додаткового очищення.
Що це означає на практиці. Якщо ви берете проби з конюшні для моніторингу залишків, не можна використовувати один універсальний протокол. Матриця (фекалії, ґрунт, підстилка) суттєво впливає на результат. Автори наголошують: без належного концентрування (випарювання) чутливість методу падає в 5–10 разів, і ви ризикуєте не побачити низькі, але екологічно значущі концентрації (на рівні мкг/кг).
Обмеження. Дослідження проводили на штучно збагачених зразках, тобто додавали відомі кількості препаратів у чисту матрицю. Реальні зразки з коней, які отримували лікування, можуть містити складніші суміші метаболітів, тож метод ще належить валідувати на клінічному матеріалі. Але як відправна точка для лабораторій, які займаються екотоксикологією у ветеринарії, робота дуже корисна.