Велика рогата худоба як джерело офтальмологічних біопродуктів: сироватка і плазма корів проти бактеріального кератиту в собак
Сироватка і плазма корів мають власний антимікробний ефект (до 49% проти Staphylococcus pseudintermedius), помірно впливають на МІК 17 офтальмологічних антибіотиків і зберігають антиколагеназні властивості. Автори радять віддавати перевагу коров'ячим біопродуктам над кінськими чи собачими та наносити їх останніми, з інтервалом ≥15 хв після антибіотиків.
Бактеріальний кератит у собак — часта причина больового синдрому і втрати зору. Навіть при агресивній терапії око може втратити прозорість через кератомаляцію («розплавлення рогівки»), фіброз, перфорацію. Тому поряд з антибіотиками топічно застосовують сироватку або плазму — вони містять фактори росту і пригнічують матриксні металопротеїнази (MMP), тобто працюють як антиколагеназні агенти.
Проблема в тому, що ці біопродукти багаті на альбумін. Альбумін зв'язує вільний антибіотик, і мікробіологічно активним залишається лише незв'язана фракція. Раніше Sebbag і співавт. показали, що сироватковий альбумін підвищує МІК 17 топічних антибіотиків — залежно від бактерії, дози й самого антибіотика. Kubai і співавт. виявили, що в собак альбумін у сироватці/плазмі сягає 14 мг/мл, у коней — 26 мг/мл, і саме собачі біопродукти давали більший зсув МІК, ніж кінські. При цьому в кінській сироватці спостерігали прямий антимікробний ефект до 97% проти Staphylococcus pseudintermedius.
У цьому дослідженні взяли кров у 10 здорових голштинських корів (без антибіотиків останні 30 днів). Кожну тварину брали двічі з інтервалом у місяць: перша порція — заморожена при −20 °C протягом місяця, друга — свіжа, зберігалася при 4 °C менше 24 год. Отримали 4 групи: свіжа сироватка, свіжа плазма, заморожена сироватка, заморожена плазма.
Альбумін вимірювали видоспецифічним ELISA (Bethyl), розведення 1:250 000. Середній рівень альбуміну — 1,98–2,00 мг/мл, тобто у 7 разів нижче, ніж у собак, і в 13 разів нижче, ніж у коней. Альфа-2-макроглобулін (ключовий антиколагеназний білок) визначали ELISA від Novus, розведення 1:500: у замороженій сироватці медіана 4 403 нг/мл (діапазон 3 542–5 499), у замороженій плазмі — 4 959 нг/мл (3 305–5 447). Різниці між свіжими і замороженими зразками за чутливістю бактерій не було — ні для сироватки, ні для плазми.
Тестували 30 клінічних ізолятів від собак з інфекційним кератитом: по 10 Staphylococcus pseudintermedius, Streptococcus canis і Pseudomonas aeruginosa. Використовували комерційні планшети Sensititre JOEYE2 з 17 топічними антибіотиками (бацитрацин, хлорамфенікол, цефазолін, еритроміцин, гентаміцин, неоміцин, офлоксацин, окситетрациклін, тобраміцин та інші). МІК читали як найнижчу концентрацію, що повністю пригнічує ріст; інтерпретацію робили за брейкпоінтами CLSI VET08 і M100.
Результати. Коров'ячі сироватка і плазма самі по собі пригнічували ріст окремих ізолятів — до 49% для замороженої плазми проти S. pseudintermedius. Порівняно з контролем МІК змінювалися різноспрямовано: підвищення в 1,33–4 рази або зниження в 0,5–0,75 раза — залежно від конкретного антибіотика й ізоляту.
Для практики. Автори рекомендують розглядати коров'ячі сироватку/плазму як переважне джерело серед біопродуктів інших видів (кінських, собачих): у них прямий антимікробний ефект, хороший антиколагеназний потенціал (альфа-2-макроглобулін) і менший вплив на чутливість до топічних антибіотиків. Через зв'язування антибіотика з альбуміном біопродукти наносити останніми, з інтервалом не менше 15 хвилин після антибіотика.