Фамотидин і омепразол у коней: дві платформи замість однієї — як обійти обмеження аналізу
Дослідники з Південної Кореї розробили подвійну аналітичну стратегію (HPLC + UHPLC-MS/MS) для одночасного визначення фамотидину та омепразолу в плазмі коней. Через різні фізико-хімічні властивості препаратів жоден окремий метод не давав точних результатів. HPLC працює для високих концентрацій, UHPLC-MS/MS — для слідових (LLOQ 50 нг/мл, у 2000 разів чутливіше). Це відкриває шлях до фармакокінетичних досліджень комбінації в коней.
Фамотидин (блокатор H2-рецепторів) та омепразол (інгібітор протонної помпи) — основні препарати для лікування виразки шлунка у коней. Їх комбінація перспективна: фамотидин діє швидко, омепразол — довго (до 24 годин). Але одночасне кількісне визначення обох речовин у плазмі — технічно складна задача.
Чому виникла проблема
Фамотидин змінює іонізаційний стан залежно від pH, що викликає роздвоєння піків на хроматограмі. Омепразол, навпаки, нестабільний у кислому середовищі — руйнується. До того ж він погано розчиняється у водних розчинах, через що калібрувальна крива стає нелінійною на високих концентраціях.
Спроба підібрати єдині умови для обох аналітів провалюється: те, що стабілізує один, руйнує інший.
Рішення: дві платформи, різні завдання
Автори розділили завдання:
- HPLC — для високих концентрацій (100–5000 мкг/мл). Пробопідготовку підкислюють: це усуває роздвоєння піків фамотидину та вирішує проблему розчинності омепразолу.
- UHPLC-MS/MS — для слідових концентрацій. Пробопідготовку проводять при нейтральному pH, щоб зберегти омепразол. Метод дозволяє визначати і метаболіт — омепразол сульфон.
Ключові цифри
- Межа кількісного визначення (LLOQ) для UHPLC-MS/MS — 50 нг/мл. Це приблизно у 2000 разів чутливіше за HPLC.
- HPLC-метод показав лінійність у діапазоні 100–5000 мкг/мл після підкислення матриці.
- Для HPLC використовували DMSO як розчинник для основних розчинів (200 мг/мл кожного аналіту).
Що це означає для практики
Поширеність виразки шлунка у скакових коней перевищує 70%, у деяких групах сягає 100%. Комбінація фамотидину з омепразолом може бути ефективнішою за монотерапію, але раніше не було валідованого методу для вивчення їх фармакокінетики саме в коней.
Розроблена стратегія дозволяє:
- Вивчати концентраційні профілі обох препаратів після спільного введення.
- Розраховувати ключові фармакокінетичні параметри.
- Оцінювати безпеку та ефективність комбінації в умовах, наближених до реального застосування.
Висновок для колег
Якщо плануєте фармакокінетичні дослідження з цими препаратами у коней — не намагайтеся втиснути обидва аналіти в один метод. Використовуйте HPLC для "грубих" концентрацій і MS/MS для слідових. Пробопідготовку підбирайте окремо під кожну платформу з урахуванням pH-чутливості кожного аналіту.