Кверцетин 50 мкМ рятує сексоване заморожене сім'я Wagyu: нові метаболомні дані
Додавання 50 мкМ кверцетину до розріджувача для сексованого замороженого сім'я австралійських биків Wagyu покращує рухливість, цілісність мембран і антиоксидантний статус після розморожування. Вищі дози (≥150 мкМ) шкодять. Метаболоміка показала зсуви в ліпідному обміні — 131 метаболіт вгору, 395 вниз.
Дослідження на сексованому замороженому сім'ї австралійських биків Wagyu перевірило, чи кверцетин у розріджувачі покращує якість сперми після розморожування. Використали 5 здорових биків 34–36 місяців, по 3 еякуляти від кожного. Кверцетин (чистота ≥98%) розчиняли в DMSO і вносили в концентраціях 0, 10, 50, 100, 150 і 200 мкМ. DMSO у всіх групах, включно з контролем, тримали нижче 0,1%.
Заморожування стандартне: розрідження 1:1, еквілібрація, базова соль I з 20% жовтка, потім соль II з 6% гліцерину в співвідношенні 1:1, соломинки 0,5 мл, пара над рідким азотом 15 хв, потім пряме занурення. Розморожування — водяна баня 50 °C, 16 с, далі розведення 1:8 теплим розчином і 15 хв при 37 °C.
Результати: група 50 мкМ показала кращу виживаність сперміїв, рухливість, прямолінійну швидкість (VSL), криволінійну швидкість (VCL) і середню швидкість шляху (VAP). Рівень ROS знизився, активність SOD, CAT і GSH-Px зросла. Високі концентрації — 150 і 200 мкМ — погіршували рухливість і низку функціональних показників. Тобто дозозалежність не лінійна: є вікно користі близько 50 мкМ і чітка токсичність вище 150 мкМ.
Метаболоміку порівнювали між 50 мкМ і контролем. Знайшли 131 метаболіт з підвищенням і 395 зі зниженням. KEGG-збагачення вказало на ліпідні шляхи — метаболізм гліцерофосфоліпідів і арахідонової кислоти. Це логічно: мембрани сперміїв багаті на поліненасичені жирні кислоти, і саме вони страждають від перекисного окиснення під час кріоушкодження.
Для практики: кверцетин у концентрації 50 мкМ у розріджувачі — робочий варіант для сексованого замороженого сім'я великої рогатої худоби, якщо потрібно зменшити оксидативний стрес і зберегти рухливість після розморожування. Перевищувати 100 мкМ не варто — отримаєте зворотний ефект. Механізм, схоже, не лише антиоксидантний, а й через перебудову ліпідного обміну, що відкриває шлях до точнішого підбору кріопротекторів.